Диагностика с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) — одно из самых перспективных направлений исследований. Оно позволяет выявлять инфекционные и вирусные заболевания на генетическом уровне. Специалисты лаборатории «Инлаб Генетикс» готовы объяснить принцип работы метода ПЦР, его особенности и преимущества. Они также расскажут о возможных недостатках технологии и результатах теста.
Суть и специфичность метода ПЦР
Для выявления вирусов и инфекций используется метод, основанный на многократном увеличении концентрации фрагментов ДНК возбудителя. Это достигается за счет воздействия ферментов и резких изменений температуры. В результате молекула дублируется, копируя интересующий специалиста участок ДНК микроорганизма. Весь процесс занимает не более 3 минут, а 30-40 таких циклов достаточно для получения достаточного количества молекул для визуального определения вида возбудителя.
Помимо амплификации (копирования молекул) ПЦР позволяет:
- Сращивать фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты;
- Вводить и тестировать мутации;
- Клонировать и выделять новые гены;
- Устанавливать отцовство и различные степени биологического родства.
В классической медицине ПЦР-диагностика применяется в нескольких областях:
- Урогинекология: для выявления инфекционных заболеваний с неясными симптомами и хроническим течением. С ее помощью можно диагностировать ЗППП, герпес и папилломавирус, что снижает риск развития рака шейки матки у женщин.
- Неонатология: позволяет обнаружить микроорганизмы, поражающие плод в утробе матери, и диагностировать неонатальные инфекции.
- Пункты сдачи крови: помогает избежать забора материала у пациентов с опасными инфекциями (ВИЧ, сифилис, гепатиты), так как ПЦР-диагностика более точна и выявляет инфекции с длительным инкубационным периодом.
- Пульмонология: используется для точного определения возбудителей атипичных пневмоний и хронических бронхитов. Позволяет быстро и точно ставить диагноз, идентифицировать штаммы вирусов.
При соблюдении техники выполнения, диагностика обеспечивает максимально точные и достоверные результаты.
Плюсы и минусы метода полимеразной цепной реакции
В отличие от традиционных методов диагностики, ПЦР-анализ выделяется своими преимуществами:
- Прямым определением возбудителя инфекции;
- Высокой специфичностью, исключающей возможность ложных результатов;
- Чувствительностью, позволяющей выявлять единичные клетки вирусов и бактерий;
- Универсальностью, позволяющей выявлять ряд возбудителей в одной пробе;
- Способностью выявлять латентные (скрытые, спящие) инфекции;
- Адекватной и доступной ценой;
- Скоростью – забор биоматериала, исследование и получение результатов занимает 4-5 часов.
Среди минусов можно выделить:
- Вероятность дублирования молекул погибших микроорганизмов. Перед диагностикой важно подождать 1-2 месяца, чтобы «мертвый» возбудитель покинул организм.
- Возможность «перекрестной» реакции. Теоретически, идентичный исследованным микроорганизмам геном может быть у неизвестных науке возбудителей.
- Мутация вирусов и инфекций. ПЦР-анализ не всегда выявляет новые штаммы возбудителя.
Несмотря на относительную новизну этого направления, ученые со временем смогут минимизировать риск ложноположительных и ложноотрицательных результатов. Уже сегодня медики проводят ряд испытаний, направленных на снижение этих рисков. В процессе исследований проверяется наличие перекрестных реакций и проводится сопоставление с известными вирусами.
