Диагностика посредством полимеразной цепной реакции – одно из самых перспективных направлений исследований, целью которых является выявление инфекционных и вирусных заболеваний на генетическом уровне. Специалисты лаборатории INLABgenetics готовы раскрыть принцип метода ПЦР, разъяснить суть и специфичность этого анализа, рассмотреть плюсы и минусы технологии и рассказать, какие результаты показывает тест.
Суть и специфичность метода ПЦР
В основе методики выявления вирусов и инфекций лежит принцип многократного увеличения концентрации фрагментов ДНК возбудителя в биологических пробах пациента под воздействием ферментов и резкого изменения температуры. В результате молекула дублируется, копируя участок, присутствующий у микроорганизма, интересующего специалиста. Цикл образования новой молекулы – не более 3 минут, 30-40 циклов хватает для того, чтобы получить количество молекул, необходимое для визуального определения вида возбудителя методом электрофореза.
Помимо амплификации (копирования молекул), ПЦР позволяет:
- Сращивать фрагменты дезоксирибонуклеиновой кислоты;
- Вводить и тестировать мутации;
- Клонировать и выделять новые гены;
- Устанавливать отцовство и различные степени биологического родства.
В классической медицине, ПЦР-диагностика используется в:
Урогинекологии, для постановки диагнозов при выявлении инфекционных заболеваний со слабовыраженными симптомами и хроническим течением. Позволяет выявлять ЗППП, герпес и папилломавирус, снижая риск появления злокачественных новообразований шейки матки у женщин;
Неонатологии, позволяя выявлять микроорганизмы, поражающие плод, вынашивающийся в утробе матери, диагностировать неонатальные инфекции и т.д.;
Пунктах сдачи крови, во избежание риска забора материала у пациентов, инфицированных опасными заболеваниями (ВИЧ, сифилис, гепатиты и т.д.), т.к. превосходит по точности иные методы, выявляя инфекции с длительным инкубационным периодом;
Пульмонологии, для точного определения возбудителей атипичных пневмоний, рецидивирующих хронических бронхитов и т.д. Позволяет ставить быстрый и точный диагноз, идентифицировать виды возбудителей, выявляя конкретный штамм вируса.
При соблюдении технологии выполнения, диагностика показывает максимально точный и достоверный результат.
Плюсы и минусы метода полимеразной цепной реакции
В отличие от «классических» методов диагностирования, «молодая» ПЦР-диагностика обладает рядом достоинств, обусловленных:
- Прямым определением возбудителя инфекции;
- Высокой специфичностью, исключающей возможность ложных результатов;
- Чувствительностью, позволяющей выявлять единичные клетки вирусов и бактерий;
- Универсальностью, позволяющей выявлять ряд возбудителей в одной пробе;
- Способностью выявлять латентные (скрытые, спящие) инфекции;
- Адекватной и доступной ценой;
- Скоростью – забор биоматериала, исследование и получение результатов занимает 4-5 часов.
К недостаткам же можно отнести:
- Вероятность дублирования молекул погибших микроорганизмов. Иными словами, перед проведением диагностики необходимо выждать 1-2 месяца: за это время, «мертвый» возбудитель должен исчезнуть из организма;
- Возможность появления «перекрестной» реакции. В теории, геном, идентичный исследованным микроорганизмам, может присутствовать и у возбудителей, неизвестных нынешней науке;
- Мутацию вирусов и инфекций. Иными словами, ПЦР-анализ не сможет уловить новые штаммы возбудителя.
Но учитывая «молодость» этого направления исследований, со временем, ученым удастся исключить риск ложноположительного или ложноотрицательного результата. Ведь уже сегодня, для уменьшения рисков, медики проводят ряд испытаний, включающих проверку на перекрестные реакции и сопоставление со всеми известными на сегодня вирусами.